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本书涉及面较广，并且有一些较大型的连续性实验，还有部分实验来源于教师的科研成果。我们希望通过《生物化学与分子生物学实验指导》的学习，使学生能够顺利完成根据实际情况所选择的实验内容，掌握生物化学与分子生物学实验基本的技术，并在今后的研究和工作中能灵活应用。

篇　基础理论和技术

　章　离心技术

　　节　基本原理

　　第二节　离心机的种类和基本结构

　　第三节　常用离心技术

　　第四节　离心技术在生物学研究中的应用

　第二章　分光光度法

　　节　基本原理

　　第二节　分光光度计

　　第三节　分光光度技术的应用

　第三章　层析技术

　　节　层析基本理论

　　第二节　常用的层析技术　

　第四章　电泳技术

　　节　基本原理

　　第二节　电泳的分类

　　第三节　常用的电泳技术

　第五章　生物化学　　实验样品制备技术

　　节　生物大分子制备的特点和一般步骤

　　第二节　植物样品的制备

　　第三节　动物样品的制备

　　第四节　微生物样品的制备

　　第五节　生物大分子——蛋白质

　　第六节　生物大分子——核酸

　第六章　真核生物基因文库的构建

　　节　cDNA文库的概念

　　第二节　cDNA文库构建的策略

　　第三节　cDNA文库的筛选

　第七章　核酸杂交技术

　　节　分子杂交的一般过程

　　第二节　分子杂交的种类

　　第三节　探针

　　第四节　印迹技术

　　第五节　杂交体系

　　第六节　杂交信号的检测方法

　第八章　聚合酶链式反应

　　节　聚合酶链式反应的发展历史

　　第二节　PCR的原理

　　第三节　PCR体系与条件

　　第四节　PCR循环参数的确定

　　第五节　PCR需注意的事项

　　第六节　PCR的种类及用途

　第九章　基因工程

　　节　基因工程的基本概念

　　第二节　基因工程的发展历史

　　第三节　基因工程的研究意义

　　第四节　基因工程的基本内容

　第十章　DNA序列测定技术

　　节　概述

　　第二节　Sanger双脱氧链终止法

　　第三节　Maxam-GilbertDNA化学降解法

　　第四节　测序策略

　　第五节　DNA序列测定自动化

　第十一章　生物芯片技术

　　节　生物芯片的概念

　　第二节　生物芯片技术的发展历史

　　第三节　生物芯片的分类及特点

　　第四节　常用生物芯片的应用

第二篇　生物化学　　实验

　第十二章　生物化学基础　　实验

　　实验一　缓冲溶液的配制和氨基酸两性性质的测定

　　实验二　分光光度计线性分辨范围的测定

　　实验三　还原糖和总糖含量的测定

　　实验四　用阳离子交换树脂摄取氯化钠

　　实验五　蛋白质的沉淀反应

　　实验六　定磷法测定RNA含量

　　实验七　紫外吸收法测定核酸的含量

　　实验八　可溶性糖的硅胶G薄层层析

　　实验九　血糖含量的测定

　　实验十　血清总胆固醇的测定

　　实验十一　血清甘油三酯的测定

　　实验十二　维生素C含量的测定(2，6-二氯酚靛酚法)

　　实验十三　氨基氮测定——甲醛滴定法

　　实验十四　酵母RNA的分离及组分鉴定

　第十三章　生物化学综合　　实验

　　实验十五　双缩脲法测定蛋白质含量

　　实验十六　Folin-酚试剂法测定蛋白质含量

　　实验十七　考马斯亮蓝法测定蛋白质含量

　　实验十八　离子交换柱层析法分离氨基酸

　　实验十九　从牛奶中分离制备酪蛋白

　　实验二十　葡聚糖凝胶层析

　　实验二十一　等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

　　实验二十二　醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质

　　实验二十三　聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白质

　　实验二十四　SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子量

　　实验二十五　蛋白质印迹(Western　blot)

　　实验二十六　血清谷丙转氨酶活性的测定

　　实验二十七　酶的专一性

　　实验二十八　激活剂和抑制剂对酶活性的影响

　　实验二十九　温度对酶活性的影响

　　实验三十　pH对酶活性的影响

　　实验三十一　底物浓度对酶促反应速度的影响——Km值的测定

　　实验三十二　绿豆超氧化物歧化酶的提取

　　实验三十三　硫酸铵沉淀法纯化SOD

　　实验三十四　葡聚糖凝胶层析脱盐

　　实验三十五　有机溶剂分级沉淀法纯化SOD

　　实验三十六　离子交换层析法纯化SOD

　　实验三十七　SOD活性的测定

　　实验三十八　绿豆SOD同工酶的鉴定

　　实验三十九　等电聚焦电泳法测定SOD的纯度及等电点

第三篇　分子生物学实验

　第十四章　分子生物学基础实验

　　实验四十　质粒DNA的提取及纯化

　　实验四十一　质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳

　　实验四十二　DNA酶切与连接

　　实验四十三　DNA片段的回收

　　实验四十四　植物组织基因组DNA的提取

　　实验四十五　动物组织基因组DNA的提取

　　实验四十六　细菌基因组DNA的制备

　　实验四十七　大肠杆茵感受态细胞的制备

　　实验四十八　外源DNA的连接与转化

　　实验四十九　重组转化子的酶切鉴定

　第十五章　分子生物学综合　　实验

　　实验五十　PCR扩增外源基因

　　实验五十一　Triz01法提取总RNA

　　……

第四篇　创新性实验

附录

参考文献　

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书籍介绍

《生物化学与分子生物学实验指导》涉及面较广，并且有一些较大型的连续性实验，还有部分实验来源于教师的科研成果。我们希望通过《生物化学与分子生物学实验指导》的学习，使学生能够顺利完成根据实际情况所选择的实验内容，掌握生物化学与分子生物学实验最基本的技术，并在今后的研究和工作中能灵活应用。